Підібрано оптимальні умови для проростання насіння, вегетативного та мікроклонального розмноження, а також індукції калюсоутворення з різних типів експлантатів та тривалого вирощування культур тканин в умовах in vitro тирличу хрещатого (Gentiana cruciata L.) з географічно віддалених популяцій. Проведено цитогенетичний аналіз культури тканин листкового і кореневого походження протягом 6-9-го місяців вирощування. Встановлено, що клітинам апікальної меристеми корінців проростків медоборської популяції G. cruciata притаманна міксоплоїдія (хромосомна мозаїчність). Встановлено міксоплоїдність клітинних популяцій калюсів кореневого та листкового походження обох популяцій. Досліджено вміст макро- і мікроелементів в рослинах G. cruciata. Ключові слова: Gentiana cruciata L., креничська і медоборська популяції, інтактні рослини і культура тканин, цитогенетичний аналіз, елементний склад.