Відпрацьовано умови для отримання асептичних рослин Gentiana asclepiadea L., G. punctata L., G. cruciata L., G. verna L. з різних популяцій та їх вегетативного розмноження in vitro. Отримано калюсні культури різного походження від рослин цих видів, здатні до тривалого росту in vitro та синтезу флавоноїдів. Розроблено метод отримання та культивування біомаси калюсних тканин тирличів у рідких живильних середовищах МС/2 та В5 із застосуванням в якості підтримуючих субстратів поролонових підкладок. Досліджено вміст флавоноїдів в інтактних рослинах тирличів та в їхніх калюсних культурах, що вирощувалися на різних субстратах. Ключові слова : види роду Gentiana L., інтактні рослини, культури тканин, підтримуючий субстрат, флавоноїди.