Відпрацьовано умови для отримання стерильних рослин Gentiana acaulis L., Gentiana lutea L., Gentiana pneumonanthe L., з різних популяцій та їх вегетативного розмноження in vitro. Отримано калюсні культури різного походження тирличів, досліджено їх динаміку росту та підібрано умови для їхньої проліферації. Розроблено метод тривалого культивування біомаси калюсних тканин тирличів на рідких живильних середовищах МС/2 із застосуванням в якості підтримуючих субстратів поролонових підкладок. Досліджено вміст флавоноїдів в інтактних рослинах тирличів та в їхніх калюсних культурах, що вирощувалися на різних субстратах. Ключові слова : Gentiana acaulis L., Gentiana lutea L., Gentiana pneumonanthe L., інтактні рослини, культури тканин, підтримуючий субстрат, флавоноїди.