Досліджено особливості проростання насіння G. punctata з різних популяцій (г. Пожижевська, г. Брескул, г Трояска) в Українських Карпатах. Отримано асептичні рослини цього виду та підібрано умови для їх вегетативного розмноження in vitro. З'ясовано особливості калюсогенезу з листкових, стеблових і кореневих експлантів G. punctata та отримано проліферативно активні калюсні культури різного походження та культуру ізольованих коренів тирлича крапчастого. Розроблено спосіб вирощування калюсної тканини G. punctata у рідкому живильному середовищі із застосуванням як підтримуючих субстратів поролонових підкладок. Досліджено вміст флавоноїдів і ксантонів в інтактних рослинах та культурі тканин. Проведено цитогенетичні дослідження культури тканин та інтактних рослин G. punctata. Ключові слова: Gentiana punctata L., культура тканин і органів, флавоноїди і ксантони, цитогенетичний аналіз.